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CAS:No.62669-70-9
英文名称:Rhodamine 123
分子式:C21H17ClN2O3
分子量:380.82
储存条件:Powder:2-8℃，2 years;Insolvent(母液):-20℃，6 months;-80℃，1 year
纯度:≥98%
Rhodamine 123 是一种可对活细胞线粒体染色的细胞染色试剂。罗丹明123可透过细胞膜且在活细胞的线粒体内聚集，并发出黄绿色荧光。罗丹明123广泛用作检测线粒体膜电位，也常用于细胞凋亡检测。由于细胞内ATP的量与罗丹明123的荧光强度之间有相关性，此荧光染料被应用于检测细胞内的ATP。
罗丹明123的最大激发波长为507nm，最大发射波长为525nm。在荧光显微镜下观察，呈现黄绿色荧光。
使用方法（仅供参考）
工作液配制
用缓冲液或者预热的培养液直接稀释储存液到需要的工作液浓度（1～20 µM），充分混匀。具体的工作液浓度使用者要根据自身实验体系进行调整。
【注意】：对于细 胞实验，要控制好总体稀释倍数，DMSO 在培养液中的浓度不能超过 0.1%，以避免 DMSO 对细胞的影响。
荧光显微镜观察
1）用载玻片准备细胞。细胞数目应为 5×104～5×105个/mL。
2）在载玻片上孵育细胞，用 PBS 或 HBSS 洗涤细胞。
3）将 Rhodamine 123 工作液加入载玻片并在 37℃下孵育 30 min 至 1 小时。
4）去除 Rhodamine 123 溶液并用培养液洗涤细胞（洗涤细胞后如果要固定，加入 10%福尔 马林缓冲液并孵育 15～20 min，接着用 PBS 洗涤）。
5）荧光显微镜观察细胞。
流式细胞仪分析
1）取对数生长期的细胞，接种到孔板，过夜培养。
2）如果要进行药物刺激，在细胞中加入感兴趣的药物进行干预，继续培养一定时间后，收集细胞，PBS 清洗 2 次。
3）加入 Rhodamine 123 工作液重悬细胞，37℃避光孵育 15 min 或更长时间。
【注意】：由于细胞种类和实验体系不同，Rhodamine 123 工作液浓度和孵育时间可以根据预实验或参考文献自行调整。
4）用流式细胞仪检测。
Solarbio实验案例（仅供参考）
1、取对数生长期A549细胞接于六孔板（1*106+2mlDMEM培养基）,37℃培养箱培养4-24h待其贴壁，以便后续实验操作.
2、弃掉培养液，PBS洗涤两次.
3、用培养基（无血清）稀释 Rh123母液制备 1～20µM Rh123工作液。具体工作浓度取决于细胞类型和细胞浓度。
4、将 Rh123工作液加入六孔板并在37℃下孵育 30 分钟.
5、去除 Rh123 工作液并用PBS洗涤三次细胞去除背景色.
6、荧光显微镜观察.
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