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CAS:No.112926-02-0
英文名称:Indo-1 AM
分子式:C47H51N3O22
分子量:1009.91
储存条件:Powder:-20℃，2 years;Insolvent(母液):-20℃，6 months;-80℃，1 year
纯度:≥95%
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Calcium measurements are critical for numerous biological investigations. Fluorescent probes that show spectral responses upon binding to Ca2+ have enabled researchers to investigate changes in intracellular free Ca2+ concentrations by using fluorescence microscopy, flow cytometry, fluorescence spectroscopy and fluorescence microplate readers. This cell-permeant Indo-1 AM , is a UV light excitable, emission ratioable Ca2+ indicator. Upon binding to Ca2+, the emission maximum of Indo-1 AM shifts from 480 nm to 400 nm. Indo-1 is preferred for flow cytometry, in which it is more practical to use a single laser for excitation, such as the 351-364 nm spectral lines of the argon-ion laser.
Fluorescence microscope（仅供参考）
Excitation Indo-1 filter set
Emission Indo-1 filter set
Recommended plate Black wall/clear bottom
Fluorescence microplate reader（仅供参考）
Excitation 340
Emission 400, 475
Cutoff Ex/Em = 340/400, no cut off. Ex/Em = 340/475, cut off 455
Recommended plate Black wall/clear bottom
Instrument specification(s) Bottom read mode/Programmable liquid handling
使用方法（仅供参考）
制备储存液
用无水 DMSO 稀释 Indo-1 AM 去配制 10 mM 的储备液。
注：Indo-1 AM 储存液建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。
工作液的配制
用预热好的 HBSS 稀释储存液，配制成 1-10 μM 的 Indo-1 AM 工作液。
注：请根据实际情况调整 Indo-1 AM 工作液浓度，且现用现配。
细胞染色
悬浮细胞
1 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在 1×106/mL。
2 加入 1 mL Indo-1 AM 工作液，室温孵育 5-30 分钟。
3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。
4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。
5 用 1 mL HBSS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
贴壁细胞
1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。
3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，孵育 5-30 分钟。
4 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟，使用荧光显微镜进行观察。
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