CAS:No.115144-35-9
英文名称:D-Luciferin potassium
分子式:C11H7KN2O3S2
分子量:318.41
储存条件:Powder:-20℃,1 year;Insolvent(母液):-20℃,6 months;-80℃,1 year
纯度:≥98%

D-荧光素(D-Luciferin)是萤光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。在镁离子存在下荧光素酶使荧光素与ATP反应,接着它被氧化形成二氧杂环丁烷结构并发出黄绿色的光。Luciferin由luc基因编码,该基因作为报告基因在多种细胞中存在。由于化学发光的低背景性,luc基因在很低的表达水平下就可以被监测到。
应用:1)活细胞、组织或生物体内luc标记基因和萤光素酶-融合基因体内/体外表达的成像分析
2)报告基因分析,免疫分析和ATP萤光卫生监测分析。
使用说明(仅供参考)
体外发光检测
(1)用314 µL无菌水溶解10 mg D-萤光素钾盐,配制成100 mM的储存液(200×)。
注:未使用的储存液建议分装储存在-20℃,避免反复冻融。
(2)用细胞培养基1∶200稀释储存液,得到1×萤光素工作液。
(3)去除培养细胞的培养基。
(4)向细胞内添加适量1×萤光素工作液,然后进行图像分析
注:在图像分析前,细胞在37℃短时间孵育后检测可增强信号。
活体成像分析
(1)用667 µL无菌的D-PBS(不含Mg2+、Ca2+ )溶解10 mgD-荧光素钾盐,得到D-萤光素钾盐工作液(15 mg/mL),0.2 µm滤膜过滤除菌。
(2)参照下表,根据不同的注射方式,注射不同的体积。
(3)注射入体内5-15min后,进行成像分析。
注射方式 | 注射剂量(仅供参考) |
静脉注射 | 按10 μL/g体重浓度,加入相应体积的15mg/mL萤光素工作液 |
腹腔注射 | 按10 μL/g体重浓度,加入相应体积的15mg/mL萤光素工作液 |
肌肉注射 | 50 μL,浓度为1–2 mg/mL萤光素工作液 |
鼻内注射 | 50 μL,浓度为3 mg/mL萤光素工作液 |
注意事项
1.工作液最终浓度建议根据不同实验体系进行优化。
2.荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
