CAS:No.2591-17-5
英文名称:D-Luciferin
分子式:C11H8N2O3S2
分子量:280.32
储存条件:Powder:-20℃,2 years;Insolvent(母液):-20℃,6 months;-80℃,1 year
纯度:≥98%

D-荧光素(D-Luciferin)是萤光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。在镁离子存在下荧光素酶使荧光素与ATP反应,接着它被氧化形成二氧杂环丁烷结构并发出黄绿色的光。Luciferin由luc基因编码,该基因作为报告基因在多种细胞中存在。由于化学发光的低背景性,luc基因在很低的表达水平下就可以被监测到。
应用:1)体外化学发光分析(in vitro)
2)活体成像实验(in vivo)
3)高灵敏度ATP分析。
使用说明(仅供参考)
体外发光检测
(1)用无菌水配置200×的D-Luciferin储备液(30mg/mL)。
注:未使用的储存液建议分装储存在-20℃,避免反复冻融。
(2)用细胞培养基1∶200稀释储存液,得到1×D-Luciferin工作液(终浓度150 μg/mL)。
(3)去除培养细胞的培养基。
(4)向细胞内添加适量1×D-Luciferin工作液,然后进行图像分析
注:在图像分析前,细胞在37℃短时间孵育后检测可增强信号。
活体成像分析
(1)用667 µL无菌的D-PBS(不含Mg2+、Ca2+ )溶解10 mgD-Luciferin,得到D-Luciferin工作液(15 mg/mL),0.2 µm滤膜过滤除菌。
(2)参照下表,根据不同的注射方式,注射不同的体积。
(3)注射入体内5-15min后,进行成像分析。
注射方式 | 注射剂量(仅供参考) |
静脉注射 | 按10 μL/g体重浓度,加入相应体积的15mg/mL萤光素工作液 |
腹腔注射 | 按10 μL/g体重浓度,加入相应体积的15mg/mL萤光素工作液 |
肌肉注射 | 50 μL,浓度为1–2 mg/mL萤光素工作液 |
鼻内注射 | 50 μL,浓度为3 mg/mL萤光素工作液 |
注意事项
1.工作液最终浓度建议根据不同实验体系进行优化。
2.荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
