别名 | 总RNA提取试剂盒 |
英文名称 | Total RNA Extraction Kit |
储存条件 | 2-8℃,避光,有效期1年 |
规格 | 50T 100T |
单位 | 盒 |
运输温度:常温运输
产品内容:
试剂名称 | 50T | 100T | 保存 |
裂解液 | 50mL | 100mL | 2-8℃ |
漂洗液 | 15mL | 30mL | RT |
洗柱液 | 50mL | 100mL | RT |
RNase free ddH2O | 15mL | 30mL | RT |
RNase free吸附柱 | 50个 | 100个 | RT |
RNase free收集管(2ml) | 50个 | 100个 | RT |
操作步骤:1. 样品处理: a. 植物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混匀。
b. 动物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液,用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。
c. 贴壁细胞:直接在培养板中加入裂解液裂解细胞,每106细胞加1ml 裂解液。用取样器吹打混匀。
d. 细胞悬液:离心收集细胞。每106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml裂解液混匀。
e. 血液处理:取0.2-1ml新鲜血液加3倍体积红细胞裂解液,混匀后室温放置10分钟,10000rpm离心1分钟。弃上清,若沉淀含有红细胞,可加入2倍体积红细胞裂解液重复裂解步骤。离心后沉淀加入1 ml裂解液混匀。
2. 将处理后的样品在室温放置5分钟,使得核酸蛋白复合物完全分离。
3. 向匀浆样品中加0.2ml氯仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置3-5分钟。
4. 2-8℃ 12000 rpm离心10分钟。RNA主要在上层无色的水相中,把水相转移到新管中,不要吸到沉淀。
5. 吸附柱前处理:在吸附柱中加入500ul 洗柱液,室温放置2分钟,2-8℃ 12,000 rpm离心2min,弃废液。
6. 第4步收集的上清中加入200ul无水乙醇混匀,加入吸附柱静置2分钟,2-8℃ 12000rpm离心2min,弃废液。
7. 向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),2-8℃ 12,000 rpm离心2min,弃废液。
8. 向吸附柱中加入600ul漂洗液,2-8℃ 12,000 rpm离心2min,弃废液。
9. 12000rpm离心2min,弃掉收集管,将吸附柱置于室温放置数分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除。
10. 将吸附柱放入新管中,向膜中央滴加50-100ul RNase free ddH2O,室温放置5min,12000rpm室温离心2min即得到RNA。
注意事项:
1,所有相关器皿耗材都应为RNase-free产品,操作过程要小心,带口罩、手套避免环境中RNA酶污染样品。
2,RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA不纯,需电泳检测。

若有提取番茄果实RNA,用这种试剂盒可以提出来吗?2023-12-01 17:31:39
您好,本试剂盒不区分物种,可用于提取植物组织总RNA。
细胞可以加裂解液放-80度保存吗,因为样本太多没时间提取?2023-11-04 09:14:03
您好,样本太多来不及进行提取建议先收集细胞沉淀保存于-80℃。
你好,浮游植物,普通小球藻是a.植物组织的处理方法吗?2023-10-22 21:26:28
您好,如果是不方便称重可以计数的样本按照细胞悬液处理方式。
里面有红细胞裂解液?2023-09-13 14:16:21
您好,试剂盒中没有红细胞裂解液,如有需要,可以看一下R1010。
是不是得自备无水乙醇?2023-07-29 16:07:56
您好,是的,需要自备无水乙醇。