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DEAE纤维素 DE-52

CAS:9013-34-7

外观(性状):白色粉末

储存条件:2-8℃

英文名称:Cellulose DE-52

有效期:1年

DEAE纤维素 DE-52
单品5赠1;10赠3
货号:
C8930
品牌:
Solarbio
SKU 北京总部 北京海淀 武汉 广州
C8930-100g 咨询 咨询 咨询 咨询
数量:
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DEAE-纤维素,它采用平均粒径为50µm的颗粒型亲水高分子聚合物,表面又用大分子糖链接枝,使它有更高的比表面积和更好的生物兼容性,保持更高载量,同时又具有更好的分辨率。由于比表面积大,平衡和洗脱的时间也更短。它经过接枝即使是纯化病毒,质粒等超大分子的物质,载量基本保持不变。


填料特征:

特点

载量大,分辨率好,使用方便。

性状      

白色或淡黄色纤维结块状

基质

高度交联纤维素      

配基

二乙基氨基乙基      

配基密度

40μmol /ml

吸附载量      

110mg HSA/ml

填料的颗粒大小

50μm

最大流速      

100cm/h      

pH范围      

3-10,在位清洗时pH范围可到2-11

化学稳定性

各种缓冲液及盐,醋酸等

物理稳定性

0.1M中性缓冲液中,12030min

保存温度      

4

注意事项:

1、 色谱柱装填

(1)所需要用到的材料的温度要与色谱操作的温度一样,液体最好做脱气处理。填料可直接称量需要的量用缓冲液溶涨一小时装柱即可,如果不好溶胀,可适当加热。

(2)在柱子下端加入20%乙醇,以除去柱子中的空气,关闭柱子出口,在柱内保留少量的20%乙醇。20%乙醇容易产生气泡,可以在里面加1%吐温避免气泡产生。也可以换成纯水装柱子,但是需要把填料中的20%乙醇也换成纯水,具体的方法取需要体积的填料在抽滤漏斗上进行,也可以小心倾去填料上的20%乙醇,再换成5倍体积的纯水,反复沉淀去上清,5次左右就可以用于装柱子。

(3)此填料颗粒比较细,所以一定要注意柱子要选择合适的筛网,不能漏,也可以取点填料加到筛网上试试,如果没有问题再将填料连续倒入柱子时,要用玻璃棒的紧靠柱子内壁引流,以减少气泡的产生,让填料先自然沉降到填料体积不再变化,而填料和上面的液体很好分层,上层溶液完全澄清,就可以开泵用适当的流速压柱子,填料体积不再变化后,再把转换头紧顶在填料上就可以平衡柱子使用。使用的流速要小于装柱子的流速。

(4)在装柱子前,填料从冰箱中取出至少要室温放置2-3个小时,这样避免装柱子时由于温度变化而使柱子中产生气泡。

2、 蛋白的结合

样品的盐浓度和pH要尽量和平衡柱子的缓冲液一致,盐浓度过高或者pH带低也许挂不上,所以要根据自己的样品做适当调整。

3、 蛋白的洗脱

这个填料如果采用线性梯度洗脱,柱子的直径和高度比最好是大于10,数值越大越有利于分离,而且样品最好别上太多,可以按约10mg/ml上样,如果采用阶段洗脱的方法,装短粗柱子就可以,上样量也没有限制。阶段洗脱容易放大,重复性好,如果洗脱条件好完全可以得到和线性梯度一样或者更好。采用什么方法完全根据自己需要。

4、 再生清洗

(1)用完之后用0.1M 醋酸洗5个柱体积,然后用2M NaCl洗5个床体积,再用水洗至中性,然后用20%乙醇保存。

(2)有机溶剂和水混合很容易产生气泡,为了避免这样情况,可以把配好的有机溶剂在室温放置过夜,再使用,这样可以避免气泡进柱子而导致柱子不能正常使用。

特别注意:
上样之前,样品至少用0.45微米膜过滤,尽量去除色素,否则色素会被吸附到填料上,影响填料的正常使用。
在使用过程中,不能使用强酸强碱,酸和碱的浓度应低于0.15摩尔。

  备注:产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。



备注:
以上数据均来自公开文献, Solarbio暂未进行独立验证, 仅供参考。
These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.

实验图
暂无详情
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